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        糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測,取樣有哪些注意事項?


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        炎癥性腸病(IBD)是一組慢性非特異性腸道炎癥性疾病,糞便鈣衛(wèi)蛋白(FC)在該病的管理中是較為理想的檢測標(biāo)志物。但FC的檢測結(jié)果易受多種因素影響,僅在取樣過程中就存在諸多變異因素,其應(yīng)用價值受到限制,因此如何規(guī)范FC的實驗室檢測是IBD診斷中重要的一環(huán)。

         

        炎癥性腸病和糞便鈣衛(wèi)蛋白

        近年來,炎癥性腸病(IBD)在我國的發(fā)病率不斷升高,已經(jīng)成為消化科較為常見的疾病。

        炎癥性腸病主要包括克羅恩?。–D)和潰瘍性結(jié)腸炎(UC)兩種類型,臨床上以腹痛、腹瀉為主要消化道表現(xiàn),以發(fā)熱、消瘦、貧血為主要全身性表現(xiàn)。這些非特異性表現(xiàn)與腸道易激綜合征極易混淆,而FC的檢測卻能很好的把兩種病人區(qū)分開,醫(yī)學(xué)研究者能通過 糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測的結(jié)果進行病情嚴(yán)重程度評估,從而減少不必要的腸鏡檢查。

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        鈣衛(wèi)蛋白是 S100 蛋白家族中的一種鈣鋅結(jié)合蛋白,其存在于中性粒細(xì)胞胞漿中,當(dāng)腸道炎癥通透性增加后會促進中性粒細(xì)胞向腸腔遷移,導(dǎo)致 糞便鈣衛(wèi)蛋白水平增高。FC成分較為穩(wěn)定,有較好的耐熱性,不易被細(xì)菌和各種酶類破壞。

        在歐洲,克羅恩病以及結(jié)腸炎組織( ECCO) 以及世界胃腸病組織( WGO) 的共識指南中,糞便鈣衛(wèi)蛋白被認(rèn)為是一種較為理想的 IBD 無創(chuàng)性標(biāo)志物。糞便鈣衛(wèi)蛋白試劑盒對于IBD的診斷、活動性評估及療效監(jiān)測具有較好的臨床價值,并具有試劑價廉、檢測無創(chuàng)、患者接受程度高和操作方便等多種優(yōu)點,對于減少非必需的腸鏡檢查,更好的提升患者體驗具有重要的意義。

         

        FC實驗室規(guī)范化操作指南

        然而,糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測目前缺少有效的外部商用質(zhì)控品,患者年齡、用藥及標(biāo)本等因素也影響檢測的準(zhǔn)確性,這為炎癥性腸病的鑒別帶來一定難度。FC檢測結(jié)果的有效性和可靠性與實驗規(guī)范密不可分,我們除了規(guī)范取樣流程,其它因素如患者年齡、用藥、腸道準(zhǔn)備及血液影響等因素也應(yīng)當(dāng)規(guī)范化。

         

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        標(biāo)本影響因素及注意事項


                         標(biāo)本影響因素

        注意事項

        標(biāo)本留取

        時間

        同一患者同一天不同時間段所排出的糞便的FC含量之間也有較大差異,排便的次數(shù)與排便 間隔的長短也會對結(jié)果產(chǎn)生影響

        清晨第 1 次排便的標(biāo)本推薦作為檢測樣本

        標(biāo)本留取

        方式

        不規(guī)范的留樣卻很可能對檢測結(jié)果產(chǎn)生較大影響

        用規(guī)范的留樣杯,在留樣過程中保持樣品清潔,避免水分蒸發(fā)或混入水份

        標(biāo)本采樣

        萃取方式

        糞便稱重采樣是采樣方式的“金標(biāo)準(zhǔn)",目前主流的商業(yè)化檢測試劑盒大多采用定量萃取管對糞便進行萃取,實際操作中糞便性狀多樣,單一萃取管萃取法,可能無法確保定量結(jié)果的準(zhǔn)確性

        如對于固態(tài)便以及糊狀便,可用萃取管直接進行采樣,而對于水樣便,則應(yīng)使用移液槍定量加樣。

        不同的試劑盒所采用的定量萃取管的結(jié)構(gòu)、設(shè)計原理、精密度也不盡一致,使用不同萃取管也會造成 FC 結(jié)果變化。

        使用與試劑盒同廠家的萃取系統(tǒng),減少差異。對于非常異質(zhì)樣的樣本,建議使用涂布器或者類似的設(shè)備進行手工均勻化

        標(biāo)本采樣

        位置

        在同一標(biāo)本的不同位置采樣,其 FC 檢測結(jié)果也會有較大差異。同一標(biāo)本不同位點的 FC 檢測值之間差異最大可達(dá) 23%。

        采樣時建議避開血液和黏液部分,在樣本頭、體、尾至少 3 個不同位置均勻取樣

        標(biāo)本存儲

        時間和溫度

        FC 在室溫下的穩(wěn)定時間尚未有一致結(jié)論,最短是 1 d,最長可以到 7 d。

        對 FC 檢測建議新鮮標(biāo)本盡快送檢

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        溫馨提示:考慮到糞便標(biāo)本的變異因素較多,各種條件對檢測水平產(chǎn)生的影響還難以確定,在實際科研中應(yīng)該進行連續(xù)多次檢測,以確保結(jié)果的可靠性和有效性。

         

        ▲標(biāo)本影響因素及注意事項

         

        德國DRG糞便鈣衛(wèi)蛋白試劑盒

        德國DRG出品的EIA-5415糞便鈣衛(wèi)蛋白試劑盒,基于ELISA夾心法原理,可以用于定量檢測糞便樣品中的鈣衛(wèi)蛋白。該試劑盒建議與制樣系統(tǒng)EIA-5674配套應(yīng)用,以減少不同品牌萃取管差異引起的標(biāo)本取樣差異,更接近良好的實驗效果。

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        科潤達(dá)生物作為德國DRG的中國代理,能夠為各界用戶穩(wěn)定供應(yīng)糞便鈣衛(wèi)蛋白試劑盒,并提供科研代測,上門代測和實驗技術(shù)指導(dǎo)等服務(wù)。我們歡迎您致電,無論是親自下單還是咨詢技術(shù)問題,我們將真誠為服務(wù)。

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