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         歡迎來深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司！我們將為您提供周到的服務(wù)！銷售熱線：86-0755-26814430  15711973608
        
        
        
        	
        
                    
                    
                    
        
        
        
    
        

        



        
  
        
    
        
      
          
        
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        聯(lián)系我們Contact us
        
  
        公司名稱：深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司
        聯(lián)系人：科潤達(dá)客服
        地址：深圳市坪山區(qū)坑梓中興路14號中城生命科學(xué)園A棟3層
        
  
        

        

        



  
        
    
        首頁 > 技術(shù)文章 > EHF  ELISA  Kit使用說明書
        
    
        EHF  ELISA  Kit使用說明書
        
    
        EHF  ELISA  Kit使用說明書
        （德國IBL*，貨號：RE57451）
        德國IBL中國*代理商“深圳科潤達(dá)生物工程有限公司”竭誠為您服務(wù)
         
        EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        此酶免試劑盒可用于流行性出血熱（EHF）病人血清中抗?jié)h坦病毒IgG和IgM的定性檢測。
        前言簡介
        流行性出血熱（EHF）又稱腎病綜合征出血熱（HFRS），是由漢坦病毒（Hantaan type）引起的。與流行性腎病相比（因近距離接觸普馬拉病毒而被傳染），HFRS的傳染性更嚴(yán)重，一般都會伴隨有尿毒癥、呼吸麻痹和伴隨有典型休克綜合癥的出血，甚至死亡。這種疾病起初的癥狀是流行性感冒樣癥狀。HFRS起初的典型癥狀是血小板減少癥和白細(xì)胞增多癥。漢坦病毒主要分布于亞洲和巴爾干各邦地區(qū)，通過直接接觸嚙齒動物、嚙齒動物的排泄物或分泌物而傳染給人。士兵、農(nóng)民和露營者都特別容易受到危險。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        實(shí)驗(yàn)原理
        包被孔中包被了重組的漢灘型漢坦病毒核殼體蛋白。在檢測IgM抗體時，為了避免由IgG抗體或類風(fēng)濕因子引起的非特異性因素的干擾，病人血清必須與類風(fēng)濕因子IgG吸附劑一起孵育。
        實(shí)驗(yàn)過程孵育期間，抗重組漢坦病毒抗原的特異性抗體會結(jié)合到固相包被板上。洗板后，我們分別用過氧化酶標(biāo)記的抗人IgG和IgM抗體檢測特異性的IgG和IgM。加入底物液后顯色，溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與結(jié)合的抗體量成正比。之后用酶標(biāo)儀讀取OD值。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        貯存及穩(wěn)定性
        試劑盒應(yīng)當(dāng)在2~8℃運(yùn)輸和儲存，避免高溫和陽光直射，沒有打開的試劑能保存到有效期。包被條在封閉的袋子內(nèi)2~8℃能保存到有效期。準(zhǔn)備好的試劑的儲存及其穩(wěn)定性在相應(yīng)章節(jié)已闡明。
        開封的微孔板密封放置2-8℃下可保存至有效期。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        樣品采集和貯存EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        人血清EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
                    
                                
        注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應(yīng)保持血液樣品的化學(xué)整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)當(dāng)離心以除去所有的微粒物質(zhì)。此試驗(yàn)要采用人血清樣本
                            		        
                
                                
        儲存
                            		                        
        2-8℃
                            		                        
        ≤-20℃
                            		                        
        避免熱源和太陽直射，避免反復(fù)凍溶。
                            		        
                
                                
        穩(wěn)定性
                            		                        
        5天
                            		                        
        12mon
                            		        
            
        EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        試劑盒成分EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
                    
                                
        規(guī)格
                            		                        
        符號
                            		                        
        成分
                            		        
                
                                
        1 x 12 x 8
                            		                        
        MTP
                            		                        
        微孔反應(yīng)板
                    即用,可分拆.預(yù)包被有重組漢灘型抗原（strain: CG 76-118）
                            		        
                
                                
        1 x 750 µL
                            		                        
        ANTI IgG CONJ CONC
                            		                        
        酶聯(lián)物（20倍濃縮）
                    過氧化酶標(biāo)記抗IgG
                            		        
                
                                
        1 x 750 µL
                            		                        
        ANTI IgM CONJ CONC
                            		                        
        酶聯(lián)物（20倍濃縮）
                    過氧化酶標(biāo)記抗IgM
                            		        
                
                                
        1 x 1.5 mL
                            		                        
        CONTROL + IgG
                            		                        
        陽性質(zhì)控IgG
                    即用.內(nèi)含:人血清,穩(wěn)定劑,防腐劑
                            		        
                
                                
        1 x 1.5 mL
                            		                        
        REFCONTROL IgG
                            		                        
        參考對照質(zhì)控IgG
                    即用.內(nèi)含:人血清,穩(wěn)定劑,防腐劑
                            		        
                
                                
        1 x 1.5 mL
                            		                        
        CONTROL + IgM
                            		                        
        陽性質(zhì)控IgM
                    即用.內(nèi)含:人血清,穩(wěn)定劑,防腐劑
                            		        
                
                                
        1 x 15 mL
                            		                        
        DILBUF CONC
                            		                        
        樣品稀釋緩沖液（20倍濃縮）
                    紅色瓶蓋.內(nèi)含:PBS，pH7.4，清潔劑和0.01%的硫柳汞
                            		        
                
                                
        1 x 1.5 mL
                            		                        
        REFCONTROL IgM
                            		                        
        參考對照質(zhì)控IgM
                    即用.內(nèi)含:人血清,穩(wěn)定劑,防腐劑
                            		        
                
                                
        1 x 1.9 mL
                            		                        
        CONTROL-
                            		                        
        陰性質(zhì)控
                    即用.內(nèi)含:人血清,穩(wěn)定劑,防腐劑
                            		        
                
                                
        1 x 100 mL
                            		                        
        WASHBUF CONC
                            		                        
        洗滌液（10倍濃縮）
                    內(nèi)含:PBS緩沖液
                            		        
                
                                
        1 x 1.5 mL
                            		                        
        RE-AB
                            		                        
        類風(fēng)濕因子吸附劑
                    即用.內(nèi)含抗-人IgG, 穩(wěn)定劑,防腐劑
                            		        
                
                                
        1 x 12 mL
                            		                        
        TMB SUBS
                            		                        
        TMB底物液
                    即用.內(nèi)含:TMB
                            		        
                
                                
        1 x 12 mL
                            		                        
        TMB STOP
                            		                        
        TMB終止液
                    即用.內(nèi)含0.5 M 硫酸
                            		        
                
                                
        1 x
                            		                        
        FOIL
                            		                        
        膠粘薄膜
                            		        
            
        EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        實(shí)驗(yàn)做需器材但試劑盒沒提供EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
         
        1、微移液管  體積（5; 20; 50; 100; 200; 1000 µL）
        2、渦旋混合器
        3、保溫箱, 37°C
        4、試管（用于樣品稀釋）
        5、8道微量移液器
        6、洗瓶,自動或半自動洗板機(jī)
        7、酶標(biāo)儀
        8、雙蒸水或去離子水
        9、吸水紙,吸嘴,計時器
        EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        實(shí)驗(yàn)前將試劑盒平衡至室溫（18-25°C）.含結(jié)晶的緩沖濃縮液可在37°C下迅速將其溶解.實(shí)驗(yàn)前將其冷卻至至室溫（18-25°C）
        EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        稀釋濃宿成分的準(zhǔn)備（以測32孔為例）EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        提示:實(shí)驗(yàn)前取所需量試劑,并迅速用于稀釋.
                    
                                
        濃縮液
                    （示例）
                            		                        
        組分
                            		                        
        體積
                            		                        
        稀釋液
                            		                        
        比例
                            		                        
        備注
                            		                        
        存儲
                            		                        
        穩(wěn)定性
                            		        
                
                                
        3mL
                            		                        
        DILBUF CONC
                            		                        
        57mL
                            		                        
        去離子水
                            		                        
        1:20
                            		                        
        充分混勻
                            		                        
        2-8°C
                            		                        
        1周
                            		        
                
                                
        10 mL
                            		                        
        WASHBUF CONC
                            		                        
        90 mL
                            		                        
        去離子水
                            		                        
        1:10
                            		                        
        充分混勻
                            		                        
        2-8°C
                            		                        
        8周
                            		        
                
                                
        200 µL
                            		                        
        ANTI IgG CONJ CONC
                    OR
                    ANTI IgM CONJ CONC
                            		                        
        3.8 mL
                            		                        
        稀釋洗滌液
                            		                        
        1:20
                            		                        
        充分混勻
                            		                        
        -
                            		                        
        實(shí)驗(yàn)結(jié)束后倒掉
                            		        
            
        EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        樣品稀釋EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
                    
                                
         
                            		                        
        稀釋
                            		                        
         
                            		                        
        比例
                            		                        
        備注
                            		                        
         
                            		                        
        穩(wěn)定性
                            		        
                
                                
        IgG樣品
                            		                        
        常規(guī)
                            		                        
        稀釋樣品稀釋液
                            		                        
        1:201
                            		                        
        10 µL+2000 µL
                            		                        
        2-8°C
                            		                        
        6周
                            		        
                
                                
        IgM樣品
                            		                        
        常規(guī)
                            		                        
        稀釋樣品稀釋液
                            		                        
        1:201
                            		                        
        10 µL+2000 µL
                    （加15 µL類風(fēng)濕因子吸附劑至250 µL稀釋血清樣品, 18-25°C孵育30分鐘）
                            		                        
        2-8°C
                            		                        
        6周
                            		        
            
        提示:未稀釋樣品可于-20°C下保持?jǐn)?shù)月
        EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        實(shí)驗(yàn)步驟EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        1.將100μl即用型陽性質(zhì)控、陰性質(zhì)控、參考對照質(zhì)控和稀釋血清樣品（如是IgM樣品,需用類風(fēng)濕因子吸附劑前處理）加入到相應(yīng)的微孔中。
        2.膠粘薄膜蓋板，37℃下溫育45分鐘。
        3.移除膠粘薄膜, 棄除孔內(nèi)反應(yīng)液.每孔加入300μl稀釋洗滌液，重復(fù)洗板4次，在吸水紙上拍干去除殘留液滴。
        4.每孔中加入100μl稀釋酶聯(lián)物（IgG 或IgM）
        5.膠粘薄膜蓋板。37℃下溫育45分鐘.
        6.移除膠粘薄膜, 棄除孔內(nèi)反應(yīng)液.每孔加入300μl稀釋洗滌液，重復(fù)洗板4次，在吸水紙上拍干去除殘留液滴。
        7.加底物液和終止液,建議用8道微移液器,保證加液相等的時間間隔。避免產(chǎn)生氣泡。
        8.每孔中加入100μl TMB底物液
        9.室溫（18-25°C）溫育10分鐘
        10.每孔中加入100μl終止液終止底物液反應(yīng)。
        11.20分鐘內(nèi)于酶標(biāo)儀450nm處讀取OD值。（參考波長：650nm）
        EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        結(jié)果計算EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        用病人樣品的OD值比上參考對照質(zhì)控的OD值計算檢驗(yàn)結(jié)果
        A病人樣品/ A參考對照質(zhì)控= Q
         EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        IgG抗體：EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
                    
                                
        Q＜1
                            		                        
        陰性：沒有檢測到抗?jié)h灘型漢坦病毒IgG抗體
                            		        
                
                                
        1≤Q≤1.5
                            		                        
        可疑灰色區(qū)域，不能明確說明結(jié)果，10天之后應(yīng)當(dāng)對疾病的病程進(jìn)行再次檢測。如果疑似病人感染了漢坦病毒，我們建議您對檢測的樣品也檢測下漢灘病毒（Hantaan）IgM抗體或檢測下普馬拉（Puumala）病毒抗體。
                            		        
                
                                
        Q＞1.5
                            		                        
        陽性：檢測到抗?jié)h灘病毒特異性IgG抗體
                            		        
            
        EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
        IgM抗體：EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
                    
                                
        Q＜1
                            		                        
        陰性：沒有檢測到抗?jié)h灘型漢坦病毒IgM抗體
                            		        
                
                                
        1≤Q≤2
                            		                        
        可疑灰色區(qū)域，不能明確說明結(jié)果，10天之后應(yīng)當(dāng)對疾病的病程進(jìn)行再次檢測。如果疑似病人感染了漢灘病毒，我們建議您對檢測的樣品也檢測下普馬拉病毒（Puumala）抗體。
                            		        
                
                                
        Q＞2
                            		                        
        陽性：檢測到抗?jié)h坦病毒特異性IgM抗體
                            		        
            

        本譯文僅供參考，詳情請以原文為準(zhǔn)。
        EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。EHF ELISA Kit。
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